Analýza monohydroxylovaných polycyklických aromatických uhlovodíků v biologických matricích

Polycyklické aromatické uhlovodíky (PAH) patří mezi všudypřítomné environmentální kontaminanty, které jsou v exponovaném organismu metabolicky odbourávány na hydroxylované metabolity (OH-PAH). Vzhledem k nepříznivým účinkům PAH na lidské zdraví (karcinogenita, mutagenita, genotoxicita) představuje monitoring výskytu jejich hydroxylovaných metabolitů v biologických matricích významný nástroj pro hodnocení expozice člověka. OH-PAH mají polárnější charakter než jejich mateřské molekuly, díky tomu jsou lépe rozpustné ve vodě a ve formě glukuronátu nebo sulfátu jsou z těla vylučovány především močí. V rámci pilotní studie jsme se v první fázi zaměřili na vývoj analytické koncovky pro stanovení 11 OH-PAH v moči. Pro identifikaci a kvantifikaci analytů byla zvolena ultra-účinná kapalinová chromatografie ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií (UHPLC–MS/MS). Vedle optimalizace chromatografické separace, především izomerů hydroxyfenantrenu (1-, 2-, 3-, 4 a 9-OH-PHEN), byly testovány parametry ionizace a MS/MS detekce s cílem dosáhnout co nejnižších limitů kvantifikace, které analýza OH-PAH v biologických matricích vyžaduje. V další fázi experimentů byl ověřen potenciál extrakce tuhou fází (SPE) a metody QuEChERS pro izolaci analytů z moči.