Stanovení selenu a jeho sloučenin v biomase mikroskopických řas
Autor: | Bc. Marie Vomáčková |
Ročník: | M2 |
Ústav: | Ústav analýzy potravin a výživy |
Školitel: | Ing. Diomid Revenco |
Selen je důležitý esenciální stopový prvek, jehož dietární dávky jsou v populaci ČR zpravidla nedostatečné. Proto se přistupuje v některých případech k suplementaci. Mikroskopické řasy mohou být vhodným nosičem selenu vzhledem ke schopnosti akumulovat selen z růstového média a transformovat anorganické sloučeniny selenu na organické sloučeniny - obvykle seleno-aminokyseliny a z nich složené peptidy a bílkoviny. Stanovení jednotlivých sloučenin selenu umožňuje přesnější odhad množství bio-dostupného selenu než stanovení celkového selenu. Předmětem práce byla analýza selenem obohacené řasy Chlorella, získané z MBÚ AVČR. Celkový obsah selenu (658 ± 29 μg/g) byl stanoven po mikrovlnném tlakovém rozkladu kyselinou dusičnou metodou ICP-MS. Enzymovou hydrolýzou desintegrovaných buněk použitím proteázy ze Streptomyces griseus bylo převedeno do roztoku 81 ± 3 % celkového selenu. V získaném hydrolyzátu byly stanoveny sloučeniny selenu iontově-párovou kapalinovou chromatografií s prvkově specifickou detekcí selenu technikou ICP-MS. Metoda umožňuje separaci a kvantifikaci selenanu, selenocystinu, Se-methyl-selenocysteinu a selenomethioninu. Hlavní sloučeninou selenu v biomase je selenomethionin, jehož obsah 940 ± 28 μg/g odpovídá asi 71 % celkového rozpustného selenu.