Komplexní validace imunoafinitních kolonek pro stanovení mykotoxinů
Autor: | Bc. Monika Jírů |
Ročník: | M2 |
Ústav: | Ústav analýzy potravin a výživy |
Školitel: | Ing. Marta Václavíková, Ph.D., Ing. Zdenka Vepříková |
Imunoafinitní kolonky (IAC) se velmi často používají pro přečištění a zakoncentrování extraktů vzorků před následnou detekcí mykotoxinů. Jejich výhodou je vysoká selektivita k cílovým analytům a díky jejich principu také nízký obsah interferujících látek ve výsledném extraktu. Na druhé straně nevýhodou jejich použití je specifita pouze pro jeden mykotoxin nebo skupinu strukturně příbuzných látek. Multi-funkční IAC AO ZON PREP® vyráběné firmou R-Biopharm Rhone obsahují tři typy imobilizovaných protilátek specifických pro aflatoxiny, ochratoxin A (OTA) a zearalenon (ZON). V rámci testování uvedených multi-funkčních kolonek byla provedena rozsáhlá validační studie pro čtyři matrice, jednalo se o ječmen, pšenici, kukuřici a pivo. Pro separaci a detekci vybraných mykotoxinů byla využita metodika U-HPLC-MS/MS. Výtěžnosti cílových analytů byly stanoveny v rozmezí 56 až 108% v závislosti na typu testované matrice. Vedle základních validačních parametrů byla testována i cross-reaktivita nejdůležitějších ZON metabolitů, tedy ?-zearalenolu (?-ZOL) a ß-zearalenolu (ß-ZOL). Výtěžnosti obou metabolitů se pohybovaly v rozmezí 96-108% pro ?-ZOL a 100-101% pro ß-ZOL.