Analýza mykotoxinů a jejich maskovaných forem v rostlinných matricích s využitím LC-MS
Autor: | Bc. Kristýna Weinertová |
Ročník: | M2 |
Ústav: | Ústav analýzy potravin a výživy |
Školitel: | Ing. Milena Zachariášová, Ph.D.; Ing. Zbyněk Džuman |
Rostliny napadené mikroskopickým vláknitými houbami mohou metabolizovat produkované mykotoxiny za vzniku konjugátů s polárními látkami, tzv. „maskovaných“ mykotoxinů. Nedostupnost analytických standardů však komplikuje jejich identifikaci a znemožňuje kvantifikaci. V dřívějších studiích byly objeveny a charakterizovány glykosylované formy deoxynivalenolu, HT-2 a T-2 toxinu, pro jejichž efektivní izolaci a zakoncentrování, bylo využito křížových reakcí imunoafinitních kolonek (IAC) dedikovaných pro mateřské toxiny. Prezentovaná studie byla zaměřena na screening a charakterizaci konjugátů dalších frekventovaně se vyskytujících fusariových mykotoxinů, nivalenolu (NIV) a zearalenonu (ZEA). V rámci jejich izolace byly testovány možnosti využití komerčně dostupných IAC dedikovaných pro NIV a ZEA. Pro separaci bylo využito ultra-účinné kapalinové chromatografie, detekce probíhala pomocí vysokorozlišovacího hmotnostního analyzátoru typu orbitrap. U většiny vzorků obsahujících NIV byla detekována též jeho glykosylovaná forma – NIV-glukosid, a všechny vzorky obsahující ZEA obsahovaly též ZEA-sulfát. Struktura těchto konjugovaných forem byla též konfirmována za použití specifické fragmentace mateřských sloučenin v systému hybridního hmotnostního analytátoru quadrupol-orbitrap.