Vývoj analytické metody pro současné stanovení statinů a významných (mezi)produktů mevalonátové dráhy v krevním séru

Statiny jsou třídou farmak, běžně používaných pro léčbu hyperlipidémie a prevenci kardiovaskulárních onemocnění. Mechanismus jejich účinku spočívá v inhibici HMG-CoA reduktázy, enzymu klíčového pro regulaci biosyntézy cholesterolu (mevalonátové dráhy). Význam inhibice této dráhy však není pouze v depleci cholesterolu, ale také jejích meziproduktů farnesyl pyrofosfátu (FPP) a geranylgeranyl pyrofosfátu (GGPP), látek podílejících se na buněčné proliferaci řady nádorů. Na našem ústavu byla již v minulosti zavedena multi-metoda pro kvantitativní stanovení osmi různých statinů v tkáňových kulturách. Cílem této práce bylo rozšíření stávající metody o nové analyty, konkrétně o významné metabolity statinů, cholesterol, estery cholesterolu, FPP a GGPP a její optimalizace pro analýzu krevního séra. Pro separaci a detekci analytů byla využita technika vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s vysokorozlišovacím hmotnostním spektrometrem typu Q-Orbitrap, díky níž lze ve vzorcích současně provádět i necílovou analýzu (např. pro retrospektivní identifikaci dalších metabolitů statinů). Tato 'univerzální' metoda umožní komplexní posouzení vlivu statinů na významné produkty a meziprodukty mevalonátové dráhy, a to bez nutnosti zavádění několika specifických postupů.